1. Defina o volume de pipetagem
Ajustar de uma faixa grande para uma faixa pequena é o método de ajuste normal, basta girar a escala no sentido anti-horário. Ao ajustar de uma faixa pequena para uma faixa grande, deve-se ajustar primeiro para exceder a escala de volume definida e depois voltar ao volume definido, para garantir a precisão da pipeta
2. Montagem das ponteiras da pipeta
Insira a pipeta verticalmente na ponta, gire-a meia volta para a esquerda e para a direita e aperte-a. O método de bater na ponta com uma pipeta é muito desaconselhável. A operação prolongada desta maneira fará com que as partes da pipeta se soltem devido ao impacto, o que fará com que o botão de ajuste da escala fique preso.
3. Para sucção e descarga, a ponta da ponta de sucção vertical é imersa abaixo de 3 mm da superfície do líquido. Antes da sucção, a ponta deve ser pré-lavada no líquido. Sucção lenta e descarga lenta. Se a quantidade for pequena, a ponta da ponta deve ficar encostada na parede interna do recipiente.
4. A pipeta que suga o líquido não deve ser colocada na horizontal. O líquido na ponta da pipeta pode facilmente contaminar o interior da pistola e causar ferrugem na mola da pistola.
5. A pipeta deve ser ajustada para a escala máxima após cada experimento para permitir que a mola retorne à sua forma original para prolongar a vida útil da pipeta
6. Ao sugar o líquido, o polegar deve ser liberado lenta e firmemente, e não deve ser liberado repentinamente, a fim de evitar que a solução seja sugada muito rapidamente e entre no dispensador de líquido para corroer o êmbolo e causar vazamento de ar .
7. Para obter maior precisão, a ponta precisa absorver a solução da amostra uma vez antes e depois pipetar formalmente, pois ao sugar a solução de proteína do soro ou solvente orgânico, uma camada de "filme líquido" permanecerá na parede interna da a ponta, resultando no volume de descarga. Erros são causados por serem muito pequenos.
8. Líquidos com alta concentração e viscosidade causarão erros. Para eliminar o valor de compensação do erro, o valor da compensação pode ser determinado por experimento. A quantidade de compensação pode ser definida alterando a leitura da janela de leitura com o botão de ajuste.
9. O dispensador de líquido pode ser calibrado pesando e calculando o peso da água pura obtida com uma balança analítica. 1mL de água destilada pesa 0,9982g a 20°C. O intervalo definido está dentro do intervalo da pipeta. Não gire o botão fora do alcance. , caso contrário irá travar o mecanismo e danificar a pipeta.
10 Ao definir o intervalo, preste atenção: o número é exibido claramente na janela do visor, gire para o intervalo desejado
11. A pipeta é estritamente proibida para absorver líquidos altamente voláteis e corrosivos (como ácido concentrado, álcali concentrado, matéria orgânica, etc.).
12. É terminantemente proibido o uso de pipeta para misturar o líquido.
13. Não use uma pipeta de grande escala para remover pequenos volumes de líquido, para não afetar a precisão. Ao mesmo tempo, se você precisar pipetar uma quantidade maior de líquido fora da faixa, use uma pipeta para operação.
Em geral, existem alguns princípios básicos de operação que devem ser seguidos para evitar erros no volume captado. Existem três fatores principais que afetam o erro do volume de sucção: ①pressão hidrostática; ②umedecimento das pontas; ③hidrodinâmica. Quando o volume da amostra é reduzido da faixa do mililitro para a faixa do microlitro, a relação das forças físicas muda, o que, para o carregamento da amostra, significa que os efeitos da força da superfície do líquido estão em contraste com os efeitos da força de seu volume ou massa ( por exemplo, gravidade) aumentou, então os fabricantes de pipetas devem considerar cuidadosamente esta situação no projeto e construção de pipetas e ponteiras, e também devem tomar cuidado ao usá-las.
Pressão hidrostática: Ao aspirar o líquido, a ponteira da pipeta só pode ser imersa em alguns mililitros do líquido para garantir as mesmas condições de pressão hidrostática da expulsão do líquido, portanto, a pipeta deve ser dispensada de maneira quase vertical devido à inclinação O método reduzirá a altura da coluna de líquido, resultando na extração de muito líquido. Se a pipeta for aspirada verticalmente a 30°C, pode ser aspirado até 0,15% a mais de líquido.
Molhamento do bico: Quando o bico for esvaziado, ainda haverá algum líquido residual na lateral do bico na forma de um filme fino 6f, cuja quantidade depende da interação do líquido com a superfície do bico, por isso é uma constante, mas varia de acordo com o material líquido. Para soluções aquosas, esse efeito umectante deve ser considerado ao construir a pipeta. Para líquidos com alta viscosidade, como soluções de proteínas, recomenda-se pipetar o líquido várias vezes antes de adicionar as amostras para garantir a consistência da adição da amostra.
Hidrodinâmica: O terceiro efeito na aspiração volumétrica é a liberação de líquido da parede externa da ponta da pipeta, na qual a geometria da ponta desempenha um papel fundamental. Para garantir condições estáveis durante a adição da amostra, a ponta do amostrador deve ficar apoiada na parede do tubo, para que o líquido possa escoar pela parede do tubo sem gotículas, cuja formação pode ser evitada devido à sua tensão superficial. O líquido é liberado da ponta. Se as pontas forem instaladas incorretamente ou usarem pontas incompatíveis, o erro relativo de adição de amostra atingirá mais de 0,4%.
